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费氏中华根瘤菌与耐盐有关基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

【摘要】费氏中华根瘤菌(Sinorhizobiumfredii)RT19与耐盐有关的4.4kbDNA片段含有3个相间的开放阅读框,经亚克隆及功能检测,证实其中的ORF2与耐盐有关.将ORF2分别克隆到表达载体pTHioHisA、B和C上,得到3个重组质粒pGA、pGB和pGC,转化大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5π.经IPTG诱导后和作SDS朠AGE分析,发现只有pGC编码的融合蛋白获得了表达.其分子量为53kDa,恰好是trxA基因编码的硫氧还蛋白与推测的蛋白质分子量之和.Western印迹证实,表达的蛋白质是trxA基因和目的基因编码的.

【关键词】

1565 0页 遗传学报(英文版) 2001年6期 免费 葛世超 刘艳宁 杨苏声

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