【摘要】为克隆马铃薯晚疫病抗性相关基因,深入研究马铃薯晚疫病抗性机制,应用SMARTLD-PCR技术,以晚疫病菌混合小种诱导48h的水平抗性马铃薯(SolanumtuberosumL.)(R-gene-free)叶片为材料,构建了一个富集晚疫病抗性相关基因的cDNA文库.为提高克隆全长cDNA的效率,将cDNA文库与RACE技术结合,依据本实验室得到的病原诱导表达片段测序结果,在其内部设计两个特异引物,与文库载体臂上的通用引物配对,以文库噬菌体DNA为模板,用高保真PCR分别扩增出cDNA5′端与3′端,从而简便、快捷地得到全长cDNA序列.采用此方法,在马铃薯中克隆了一个受晚疫病菌诱导表达的
【关键词】
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