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粘着斑激酶的原核表达、纯化及抗体的制备

【摘要】粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)是细胞质内单亚基非受体型酪氨酸激酶,通过各种信号途径参与调节细胞生长、发育、黏附、细胞骨架重组、转化、扩散和迁移等过程.采用PCR方法,从Flag-FAK质粒中克隆编码FAKC端273个氨基酸的基因片段,构建FAK融合蛋白原核表达载体pET28a(+)/FAK,进行原核表达与蛋白纯化,取纯化的FAK蛋白免疫小鼠,制备FAK抗血清.结果表明构建的表达FAKC端功能结构域的原核表达质粒pET28a(+)/FAK,经过BL21(DE3)大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化,获得相对分子质量约33kDa的融合蛋白,并利用小鼠制备了多克隆抗体

【关键词】

4209 0页 分子科学学报(中英文版) 2007年2期 免费 孙军1,2 王俊杰1 秦波1 伏秀青1

全文来源于知网

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